登革熱NS1抗原快速檢測卡預(yù)期用途

此色譜層析條可用于人血清中NS1的定性檢測。它可以在IgG和IgM抗體出現(xiàn)之前對人血清中的登革熱病毒進(jìn)行早期診斷，僅用于研究。

實驗原理

登革熱NS1快速檢測是基于人血清中NS1抗原檢測的免疫試驗。試驗區(qū)纖維膜上包被有NS1特異性抗體，還設(shè)置了獨立的質(zhì)控區(qū)，以確保試驗的有效性。試驗中，將樣本直接加至樣本加樣區(qū)，然后將其放置在含有3滴緩沖液的貯存孔內(nèi)，樣本與緩沖液混合，然后與膠體金結(jié)合的NS1特異性單抗反應(yīng)，液體在纖維膜上移動（毛細(xì)血管作用），與纖維膜上包被的抗NS1抗體反應(yīng)，如果樣本中存在抗原，試驗區(qū)就會出現(xiàn)紅色條帶，如果試驗操作正確，質(zhì)控區(qū)也會出現(xiàn)紅色條帶，則表示試驗有效。

整個試驗過程大約

試劑盒組成

1. 快速檢測條：25人份

2. Chase緩沖液，1瓶，6ml，室溫儲存

3. 64個貯存微孔

實驗所需材料但試劑盒未提供

1. 移液器和槍頭，5-50ul

樣本采集與準(zhǔn)備

1.    此試驗只能使用人血清，由于試劑未得到優(yōu)化，所以不能直接用于全血或血漿的檢測

2.    從紅細(xì)胞凝塊中提取出血清，不能使用溶血

3.    樣品采集后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗，不要將血清長時間放置在室溫下

4.    采取靜脈穿刺采血，樣品在2-8℃下可保存7天，-20℃或更低溫度可保存30天，想要保存更長時間，應(yīng)貯存在-70℃，避免反復(fù)凍融

5.    使用前應(yīng)將凍存的樣品在室溫下溶解

6.    如果血清是需運輸?shù)?，則需根據(jù)聯(lián)邦感染試劑運輸法規(guī)進(jìn)行包裝運輸

實驗步驟                                                               

實驗開始前，將快速檢測條和試驗樣本平衡至室溫，確保無物理損壞（如纖維膜刮傷，襯墊撕裂等），試驗中可以采用類似于酶免96孔板的貯存微孔，不能重復(fù)使用樣本貯存孔

1. 加3滴（大約120ul）Chase緩沖液至微孔中

2. 樣本底板上（sample pad ）加50ul的試驗樣本，樣本底板位置在箭頭的之間，見下圖。不要將樣本加至緩沖液底板（buffer pad ）

3. 立即將快速檢測條放入貯存微孔內(nèi)，確保樣本側(cè)向下朝微孔方向，如果20秒內(nèi)未出現(xiàn)紅色條帶，輕輕拍打樣本底板以上的箭頭部位，使樣本和酶聯(lián)物移動

4. 30min后立即讀取結(jié)果，超過了45min則會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果

結(jié)果說明

陽性結(jié)果：當(dāng)質(zhì)控區(qū)和樣本區(qū)都出現(xiàn)了紅色條帶時則判斷為陽性，條帶模糊也判定為陽性

陰性結(jié)果：只有質(zhì)控區(qū)出現(xiàn)了紅色條帶，試驗區(qū)并沒有時則認(rèn)定實驗結(jié)果為陰性

試驗無效：質(zhì)控區(qū)無紅色條帶出現(xiàn)則試驗無效，如果質(zhì)控線沒有但試驗區(qū)出現(xiàn)紅色條帶則試驗也為無效，檢驗重新采樣檢測

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